Nov 18, 2022

Public workspace LAMP - Kit WarmStart Colorimetric LAMP 2x Master Mix (DNA & RNA), marca New England Biolabs

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Protocol Citationmarcellaa 2022. LAMP - Kit WarmStart Colorimetric LAMP 2x Master Mix (DNA & RNA), marca New England Biolabs. protocols.io https://dx.doi.org/10.17504/protocols.io.eq2ly7jpmlx9/v1
License: This is an open access protocol distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License,  which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited
Protocol status: In development
We are still developing and optimizing this protocol
Created: November 12, 2022
Last Modified: November 18, 2022
Protocol Integer ID: 72671
Abstract
Reação de LAMP para identificação de isolados de Sporothrix brasiliensis - Kit WarmStart Colorimetric LAMP 2x Master Mix (DNA & RNA), marca New England Biolabs.
Preparo
Preparo
Identifique corretamente os eppendorfs com a ID das amostras a serem testadas;
Pipete 5 μL do mix de LAMP em cada eppendorf;


Pipete 1 μL do mix de primers de LAMP;

Pipete 3 μL de água miliq;

Nos controles negativos adicione mais 1 μL de água miliq (total de 4 μL);
Amostras
Amostras
Pipete 1 μL de amostra em cada eppendorf correspondente;
Aquecimento
Aquecimento
Incubar os eppendorfs a 65º por 30 minutos;
Nota: o resultado positivo é percebido pela mudança na coloração do meio de rosa pink para amarelo; mudanças para a cor laranja indicam resultado positivo, necessitando de tempo maior de incubação.

Verifique o resultado da reação após 30 minutos; caso não tenha ocorrido nenhuma mudança na coloração, incube por mais 10 minutos e repita o processo até a identificação de alguma mudança na coloração do meio ou até 60 minutos.