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Dieses Protokoll beschreibt die Schritte für die Sammlung von Frischgewebe, Gefriergewebe (Fresh-frozen), und Blut von Patienten mit Harnblasenkarzinom nach Zystektomie.
Zuständige Pathologie:
Simon Schallenberg, Tel.: 536054
Florian Roßner, Tel.
Sefer Elezkurtaj
Zuständige Klinik für Radiologie:
Markus Lerchbaumer, Tel.: 657084
Kontakt Patientenmanagment
Silvia Stark, Tel.: 615028
Nadine Stremlau, Tel.: 615029
Kontakt Schnellschnitt
Ines Görmar, Tel.: 536136/636136
Materials
Transportmedium
pro 15 ml Tube
Anteil [%]
Bestandteil
Cat #
Bemerkungen
10 ml
98
MEM
31095-029
0,2 ml
2
Zellshield (100x)
13-0050
vor dem 15.5.2023 wurde nur 1 % Zellshield verwendet
Gefriermedium
Menge
Bestandteil
Cat #
10 ml
DMSO
90 ml
FBS
FBS. S 0615
50 ml Falcons
2 ml Kryoröhrchen
Stanzen 6 mm (hinterlegt im Schnellschnitt)
Gewebeschein + Stifte
Sterile Glas-Petrischale und Pinzette
Before start
Vor der OP:
Patienten werden von Michela de Martino im Rahmen der Biobank Planung identifiziert und gegebenenfalls gemeinsam besprochen.
Die Patientenliste mit Datum der vorstationären Aufnahme wird jeweils am Donnerstag an das Patientenmanagement geschickt.
Wenn ein Patient die EVEs unterschrieben hat und Blut abgenommen wurde, wird in SAP im Bemerkungsfeld für das OP-Personal vermerkt, dass sie die entnommene Blase nativ in das Schnellschnittlabor schicken sollen.
Ebenfalls am Donnerstag der Vorwoche eine Email mit Gewebewünschen an ines.görmar@charite.de aus dem Schnellschnittlabor schicken und ggf. am OP-Tag nochmals telefonische Kontaktaufnahme.
Änderungen im OP-Plan sollten im besten Fall täglich überprüft und mit dem Team abgesprochen werden.
Am Tag der OP:
Vorbereitung:
Lokalisation des Tumors und Vortherapie recherchieren
Flüssigen Stickstoff, sowie die Tüte mit Gewebescheinen; Tubes und Stiften bereit haben.
Gewebesammlung im Schnellschnitt
Gewebesammlung im Schnellschnitt
Nach Rückmeldung des Schnellschnitts geht eine Person zur Gewebeentnahme.
Tüte Blase und Stickstoffbehälter mitnehmen.
Arbeitsanleitung (siehe Abbildung) beachten.
4x 15 ml Falcons mit 10,2 ml Transportmedium (bis 9/2023 50 ml Falcon mit 15 ml) aus dem Kühlschrank im Schnellschnitt nehmen.
Bis 9/2023: Vorgelabelte Röhrchen aus dem Unterschrank nehmen und Probennummer auf Gewebeschein notieren.
Ab 9/2023: Röhrchen mit in den Schnellschnitt nehmen; zu vergebenen Probennummer vorher recherchieren und auf Gewebeschein notieren + Tubes labeln wenn klar ist, dass eine Gewebeentnahme erfolgen kann
Entnahmen durch den Pathologen:
Kriterium
Beschreibung Planung
Makroskopische Heterogenität
Falls makroskopisch unterschiedliche Regionen zu erkennen sind, bitte Proben aus den unterschiedlichen Regionen entnehmen.
Vorbehandlung mit neoadjuvanter chemotherapy
Im Falle eines guten Ansprechens auf die neoadjuvante Therapie, möglichst eine Probe aus nicht-viablem Gewebe entnehmen. Rest aus viablen Bereichen.
Mit einer Stanze 2x (für Frischgewebe und Fresh Frozen) je ein Stück Tumorgewebe entnehmen, welches horizontal in Mucosa- und muskuläre (invasive) Seite geteilt und auf 2 Mediumröhrchen bzw. 2 Kryoröhrchen verteilt wird. Hierbei ist die Beschriftung T1 für die Mucosa und T2 für die Invasive Seite zu verwenden. (Pro 5 cm Durchmesser des Tumors wird eine Probe gesammelt.)
Mit einem Messer/Skalpell ein möglichst flaches Gewebestück aus dem tumornahen Normalgewebe, welches auf ein Mediumröhrchen und ein Kryoröhrchen aufgeteilt wird.